УДК 582. 284


ИЗУЧЕНИЕ НАКОПЛЕНИЯ БИОМАССЫ PLEUROTUS OSTREATUS В РЕЗУЛЬТАТЕ ВЛИЯНИЯ КУЛЬТУРАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ СТРЕПТОМИЦЕТА


Никитенко Т.Г., Жерносекова И.В., Винников А. И.,

Днепропетровский национальный университет имени Олеся Гончара,

г. Днепропетровск, Украина


Известно, что дефицит белка на планете остается глобальной проблемой современности. Частично снизить такой дефицит возможно в результате применения биотехнологических подходов культивирования съедобных грибов вешенки обыкновенной – Pleurotus ostreatus.  Культивирование вешенки в глубинных условиях на жидких комплексных средах дает возможность получить белковую биомассу гриба, которую в дальнейшем можно использовать как посевной материал для получения плодовых тел [1]. В связи с выше изложенным, исследования, посвященные   процессам стимуляции   биомассы съедобных грибов P. оstreatus, являются актуальными.

Из литературных источников известно, что для стимуляции роста растений, грибов используют природные и синтетические регуляторы роста [2,3].  Штамм стрептомицета из коллекции микроорганизмов кафедры микробиологии, вирусологии и биотехнологии ДНУ – Streptomyces recifensis var. lyticus 2Р-15 синтезирует регулятор роста, проявляющий стимулирующее действие в отношении клеток бактерий, дрожжей, растений. В связи с этим, представляло интерес изучить возможность применения культуральной жидкости данного штамма для повышения синтеза биомассы вешенки, что послужило целью настоящего исследования.

Штамм гриба вешенки (Китайский черный) в количестве 15 мг на одну колбу емкостью 250 мл засевали в жидкую среду Гаузе с использованием дрожжевого автолизата (0,5%; 1,0%; 2,0%) как источника углеродного питания. Исследовали влияние супернатанта культуральной жидкости штамма 2Р-15 в концентрации 0,001% и 0,01% на прирост биомассы вешенки. Культивирование проводили в условиях встряхивания (220 об/мин) при температуре 26° С. Накопление биомассы P. оstreatus апределяли весовым методом на 5-е сутки культивирования.

В результате проведенных экспериментов показано, что в контрольном варианте исследования, где культуральная жидкость стрептомицета отсутствовала, на фоне увеличения концентрации дрожжевого автолизата с 0,5% до 2,0% происходит двукратное накопление биомассы гриба, т.е. уровень биомассы вешенки увеличивался с 2,14 г/л до 4,96 г/л (таблица). Подобный эффект увеличения биомассы клеток с применением дрожжевого автолизата описан в литературе для бактерий [4,5].  Такой процесс стимуляции биомассы связывают со свойствами дрожжевого автолизата, являющегося источником аминокислот, витаминов, микро- и макроэлементов, которые выступают факторами роста для микроорганизмов.

Таблица 1 – Прирост биомассы вешенки в результате влияния культуральной жидкости стрептомицета        

Вариант опыта

Концентрация дрожжевого автолизата, %

             0,5

             1,0

             2,0

Контроль
(без культуральной
жидкости)

Биомасса, г/л

% к    К

Биомасса, г/л

% к К

Биомасса, г/л

% к    К

2,14±0,12

100

2,6±0,10

100

4,96±0,21

100

Культура-
льная
жидкость




0,001%

                    *

1,62±0,09


75,70

                       *

2,9±0,03


111,5

                       *
6,96±0,07


143,3


0,01%

                       *
1,70±0,11


79,40


2,64±0,07


101,5

                       *
6,90±0,20


139,1

*­­­­– достоверность на 0,05% уровне значимости

Накопление биомассы вешенки происходит интенсивнее по сравнению с контролем в результате влияния культуральной жидкости стрептомицета. Так, внесение в среду культивирования гриба 0,001% или 0,01% культуральной жидкости штамма 2Р-15 приводит к увеличению биомассы вешенки  в среднем в 2,5 раза. Следует отметить, что достоверный показатель максимального прироста биомассы гриба достигал 6,96 ± 0,07 г/л на фоне 2,0% автолизата дрожжей в результате влияния 0,001% культуральной жидкости, что превышало значение контроля на 40,3% (таблица). При минимальной концентрации источника углерода – 0,5% достоверно показано, что влияния испытуемых концентраций культуральной жидкости штамма 2Р-15 на прирост биомассы вешенки не выявлено.

Таким образом, в условиях глубинного культивирования вешенки на фоне определенной концентрации дрожжевого автолизата – 2,0%, удалось получить максимальное увеличение накопления биомассы P. оstreatus в результате влияния 0,001% культуральной жидкости штамма 2Р-15.


Список литературы:

1.  Пат. 2186851 Россия, С12 Р21/00, С12 N1/14, С12 N1/14, С12 R1: 645. Способ получения биомассы гриба вешенки обыкновенной / Біттєєва М.Б. Заявл. 31.07.01. Опубл. 10.08.02, Бюл. № 6.

2. New plant growth regulators: basic research and technologies of application . Monograph / Ed. S.P. Ponomarenko, G.O. Iutynska. – Kyiv: Nichlava, 2011. – 211 p.

3. Цавкелова Е.А., Климова С.Б., Чердынцева Т.А., Нетрусов А.И. Микроорганизмы – продуценты стимуляторов роста растений и их практическое применение (обзор) // Прикладная биохимия и микробиология. – 2006. – Т. 42, №2. – С. 133-143.

4. Михлина Э.Д., Радиной В.П. Активизация молочнокислых бактерий // Прикл. биохим. и микробиол. – М.:Изд-во Наука, 1981. – Т. 17, Вып. 3. – С. 348-367.

5. А.с. 1065475 СССР, МКИ С 12N1/20 Питательная среда для культивирования коринебактерий дифтерии / И.Л. Маргулис, В.Н. Бочкова, Н.М. Головина и др. – Опубл. 07.01.1984, Бюл. №1.